Dèan sgrùdadh air sùbailteachd rothairean teirmeach ann an rannsachadh

Tha rothairean teirmeach, ris an canar cuideachd innealan PCR, nan innealan cudromach ann am bith-eòlas moileciuil agus rannsachadh gintinneachd. Tha na h-ionnstramaidean sin air an cleachdadh gus DNA agus RNA a mheudachadh tro theicneòlas freagairt slabhraidh polymerase (PCR). Ach, chan eil sùbailteachd rothairean teirmeach cuingealaichte ri tagraidhean PCR. San artaigil seo, nì sinn sgrùdadh air na diofar dhòighean anns a bheil cearcallan teirmeach air an cleachdadh ann an rannsachadh agus cho cudromach sa tha iad ann a bhith ag adhartachadh eòlas saidheansail.

1. Meudachadh PCR

Prìomh obair acearcall teirmeachairson leudachadh PCR a dhèanamh, a tha deatamach airson grunn thagraidhean bith-eòlas moileciuil. Le bhith a’ cur sampall DNA no RNA gu sreath de dh’ atharrachaidhean teothachd, bidh rothaichean teirmeach a’ brosnachadh dì-nàdurachadh, annealing, agus leudachadh dualan searbhag niuclasach, a’ leantainn gu leudachadh eas-chruthach air sreathan targaid sònraichte. Tha am pròiseas seo deatamach airson mion-sgrùdadh ginteil, sgrùdaidhean faireachdainn gine, agus lorg riochdairean gabhaltach.

2. Àireamhail PCR (qPCR)

A bharrachd air PCR àbhaisteach, thathas a’ cleachdadh rothairean teirmeach airson PCR cainneachdail no qPCR, a’ ceadachadh targaidean searbhag niuclasach a thomhas ann an sampall. Le bhith a’ toirt a-steach dathan fluorescent no probes, faodaidh cearcallan teirmeach cruinneachadh thoraidhean PCR a thomhas ann an àm fìor, a’ toirt seachad seallaidhean luachmhor air ìrean faireachdainn gine, eallach viral, agus atharrachadh ginteil.

3. Ath-sgrìobhadh air ais PCR (RT-PCR)

Tha àite deatamach aig rothaichean teirmeach ann an tar-sgrìobhadh cùil PCR, dòigh-obrach a thionndaidheas RNA gu DNA co-phàirteach (cDNA) airson leudachadh às deidh sin. Tha an dòigh seo deatamach airson a bhith a’ sgrùdadh abairt gine, bhìorasan RNA, agus pàtrain splicing mRNA. Tha cearcall teirmeach le smachd teothachd mionaideach deatamach airson soirbheachas deuchainnean RT-PCR.

4. PCR didseatach

Tha adhartasan ann an teicneòlas cearcall teirmeach air leantainn gu leasachadh PCR didseatach, dòigh air leth mothachail airson tomhas iomlan de dh’ aigéid niuclasach. Le bhith a’ roinneadh freagairt PCR ann am mìltean de mhic-mheanbhrathan fa-leth, faodaidh rothaichean teirmeach co-dhùnadh ceart a dhèanamh air a’ chiad ìre de mholacile targaid, a’ dèanamh PCR didseatach na inneal luachmhor airson lorg mùthaidh tearc agus mion-sgrùdadh atharrachadh àireamh a chopaigeadh.

5. Ag ullachadh leabharlannan seicheamhan an ath ghinealach

Tha rothairean teirmeach nam pàirt riatanach den phròiseas ullachaidh leabharlainn airson tagraidhean an ath ghinealach (NGS). Le bhith a’ coileanadh leudachadh stèidhichte air PCR air mìrean DNA, bidh cearcallan teirmeach a’ comasachadh leabharlannan seicheamhachaidh a thogail bho stuthan tòiseachaidh cuibhrichte, a’ leigeil le luchd-rannsachaidh sgrùdadh a dhèanamh air genoma, transcriptome, no epigenome iomlan organism.

6. Innleadaireachd Pròtain agus Mutagenesis

A bharrachd air àrdachadh searbhag niuclasach, thathas a’ cleachdadh rothairean teirmeach ann an innleadaireachd pròtain agus sgrùdaidhean mutagenesis. Bidh mutagenesis air a stiùireadh le làrach, optimization abairt pròtain, agus deuchainnean mean-fhàs stiùirichte gu tric an urra ri dòighean stèidhichte air PCR, agus tha cearcallan teirmeach le smachd teothachd mionaideach agus ìrean teasachaidh is fuarachaidh èideadh deatamach airson toraidhean ceart agus ath-riochdachadh fhaighinn.

7. Deuchainn àrainneachd agus sàbhailteachd bìdh

Bithear cuideachd a’ cleachdadh baidhsagalan teirmeach ann an deuchainnean àrainneachd agus sàbhailteachd bìdh, gu sònraichte lorg pathogens microbial, fàs-bheairtean a chaidh atharrachadh gu ginteil (GMO) agus pathogenan air an giùlan le biadh. Bidh deuchainnean stèidhichte air PCR a bhios a’ ruith air rothairean teirmeach a’ comasachadh stuthan truaillidh a chomharrachadh gu luath agus gu sònraichte, a’ dèanamh cinnteach à sàbhailteachd agus càileachd sampaill bìdh is àrainneachd.

Ann an geàrr-chunntas,rothaichean teirmeachnan innealan riatanach ann an rannsachadh bith-eòlas moileciuil agus gintinneachd, a’ solarachadh raon farsaing de thagraidhean taobh a-muigh leudachadh PCR traidiseanta. Tha an sùbailteachd agus an cruinneas gan dèanamh deatamach airson deuchainnean bho mhion-sgrùdadh gine gu sgrùdadh àrainneachd. Mar a bhios teicneòlas a’ dol air adhart, tha e coltach gum bi àite a tha a’ sìor fhàs cudromach aig rothaichean teirmeach ann a bhith a’ stiùireadh lorg saidheansail agus ùr-ghnàthachadh.