Rannsaich iomadachd innealan-cuairteachaidh teirmeach ann an rannsachadh

Tha innealan-cuairteachaidh teirmeach, ris an canar cuideachd innealan PCR, nan innealan cudromach ann an rannsachadh bith-eòlas moileciuil agus gintinneachd. Bithear a’ cleachdadh nan ionnstramaidean seo gus DNA agus RNA a mheudachadh tro theicneòlas ath-bhualadh slabhraidh polymerase (PCR). Ach, chan eil iomadachd innealan-cuairteachaidh teirmeach cuingealaichte ri tagraidhean PCR. San artaigil seo, rannsaichidh sinn na diofar dhòighean anns a bheil innealan-cuairteachaidh teirmeach air an cleachdadh ann an rannsachadh agus an cudromachd ann a bhith a’ leasachadh eòlas saidheansail.

1. Leudachadh PCR

Prìomh dhleastanas arothaiche teirmeach’S e iomadachadh PCR a dhèanamh, rud a tha deatamach airson grunn thagraidhean bith-eòlas moileciuil. Le bhith a’ cur sampall DNA no RNA fo shreath de dh’atharrachaidhean teòthachd, bidh innealan-rothaireachd teirmeach a’ brosnachadh dì-nàdarrachadh, teasachadh, agus leudachadh snàithleanan searbhag niuclasach, agus mar thoradh air sin bidh iomadachadh eas-chruthach de shreathan targaid sònraichte. Tha am pròiseas seo deatamach airson mion-sgrùdadh ginteil, sgrùdaidhean abairtean gine, agus lorg riochdairean gabhaltach.

2. PCR Cainneachdail (qPCR)

A bharrachd air PCR àbhaisteach, thathas a’ cleachdadh innealan-rothaireachd teirmeach airson PCR cainneachdail no qPCR, a’ leigeil le targaidean searbhag niùclasach ann an sampall a thomhas. Le bhith a’ toirt a-steach dathan no proban fluorescent, faodaidh innealan-rothaireachd teirmeach cruinneachadh thoraidhean PCR a thomhas ann an àm fìor, a’ toirt seachad lèirsinn luachmhor air ìrean abairtean gine, luchd bhìorasach, agus atharrachadh ginteil.

3. PCR tar-sgrìobhaidh cùil (RT-PCR)

Tha pàirt riatanach aig rothairean teirmeach ann am PCR tar-sgrìobhaidh cùil, dòigh-obrach a bhios ag atharrachadh RNA gu DNA co-phàirteach (cDNA) airson iomadachadh às dèidh sin. Tha an dòigh seo deatamach airson sgrùdadh a dhèanamh air abairt gine, bhìorasan RNA, agus pàtrain spliseadh mRNA. Tha rothaire teirmeach le smachd teòthachd mionaideach deatamach airson soirbheachas deuchainnean RT-PCR.

4. PCR didseatach

Tha adhartasan ann an teicneòlas rothairean teirmeach air leantainn gu leasachadh PCR didseatach, dòigh air leth mothachail airson tomhas iomlan de dh’aigéid niùclasach. Le bhith a’ roinn ath-bhualadh PCR ann am mìltean de mhicro-ath-bheachdan fa leth, faodaidh rothairean teirmeach dùmhlachd tùsail moileciuil targaid a dhearbhadh gu ceart, a’ dèanamh PCR didseatach na inneal luachmhor airson lorg mùthaidhean tearc agus mion-sgrùdadh atharrachaidh àireamh lethbhric.

5. Ullachadh leabharlannan sreathachaidh an ath ghinealaich

Tha rothairean teirmeach nam pàirt riatanach de phròiseas ullachaidh leabharlainn airson tagraidhean sreath-ghinealach an ath ghinealaich (NGS). Le bhith a’ dèanamh iomadachadh stèidhichte air PCR air mìrean DNA, bidh rothairean teirmeach a’ comasachadh togail leabharlannan sreath-ghinealach bho stuth tòiseachaidh cuibhrichte, a’ leigeil le luchd-rannsachaidh mion-sgrùdadh a dhèanamh air genome, transcriptome, no epigenome iomlan organsaigh.

6. Innleadaireachd Phròtain agus Mutagenesis

A bharrachd air iomadachadh searbhag niuclasach, thathas a’ cleachdadh innealan-cuairteachaidh teirmeach ann an innleadaireachd phròtain agus sgrùdaidhean mutagenesis. Bidh mutagenesis air a stiùireadh air an làrach, leasachadh abairt pròtain, agus deuchainnean mean-fhàs stiùirichte gu tric an urra ri dòighean stèidhichte air PCR, agus tha innealan-cuairteachaidh teirmeach le smachd teothachd mionaideach agus ìrean teasachaidh is fuarachaidh aonfhoirmeil deatamach airson toraidhean ceart agus ath-riochdachadh fhaighinn.

7. Deuchainn àrainneachdail agus sàbhailteachd bìdh

Bithear cuideachd a’ cleachdadh innealan-rothaireachd teirmeach ann an deuchainnean àrainneachdail is sàbhailteachd bìdh, gu sònraichte lorg pathogens meanbh-fhàs-bheairtean, fàs-bheairtean atharraichte gu ginteil (GMOn) agus pathogens a tha air an giùlan le biadh. Leigidh deuchainnean stèidhichte air PCR a thèid a ruith air innealan-rothaireachd teirmeach le bhith a’ comharrachadh truailleadh gu luath agus gu sònraichte, a’ dèanamh cinnteach à sàbhailteachd agus càileachd shampaill bìdh is àrainneachdail.

Ann an geàrr-chunntas,innealan-cuairteachaidh teirmeach’S e innealan riatanach a th’ annta ann am bith-eòlas moileciuil agus rannsachadh gintinneachd, a’ toirt seachad raon farsaing de thagraidhean a bharrachd air leudachadh PCR traidiseanta. Tha an iomadachd agus an cruinneas gan dèanamh deatamach airson deuchainnean bho mhion-sgrùdadh abairtean gine gu sgrùdadh àrainneachdail. Mar a bhios teicneòlas a’ sìor fhàs, tha coltas ann gum bi pàirt a tha a’ sìor fhàs cudromach aig rothairean teirmeach ann a bhith a’ stiùireadh lorg saidheansail agus ùr-ghnàthachadh.